Dados do Trabalho

Título

O papel do miR-205 na migração de queratinócitos humanos em resposta à Leishmania braziliensis

Introdução

A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença caracterizada pela formação de lesões ulceradas e uma inflamação crônica exacerbada.A reprogramação dos transcritos celulares do hospedeiro é uma estratégia crucial para modular a expressão de genes relacionados à resposta imune.Nesse processo,pequenos RNAs, como os microRNAs (miRNAs),desempenham um papel fundamental de importantes reguladores da expressão gênica.Dados do nosso grupo mostraram que, a expressão do miR-205 encontra-se inibido em biópsias de pacientes com LC e em outras doenças inflamatórias de pele (Psoríase, Lúpus e Hanseníase).A expressão do miR-205 foi validada em novas biópsias e em queratinócitos humanos (HaCats) expostos a Leishmania braziliensis (Lb).Ensaios de migração celular mostraram que a Lb reduz a migração dessas células e o miR-205 a aumenta.

Objetivo (s)

Investigar o papel do miR-205 na migração de queratinócitos humanos expostos a Lb.

Material e Métodos

As Hacats foram expostas a Lb por 4 ou 24 horas mediante lesões mecânicas a fim de avaliar a formação de complexos de adesão pela imunomarcação da quinase de adesão focal (p-FAK) e p-paxilina, a polimerização do citoesqueleto de actina por faloidina através da microscopia de fluorescência confocal.Foi realizado também,ensaios para avaliação da capacidade de migração dos queratinócitos por ensaio de transwell.Os ensaios com o miR-205 estão em andamento.

Resultados e Conclusão

A exposição de HaCats a Lb modulou a expressão de FAK, faloidina e paxilina nos tempos de 4 e 24 horas. Essa modulação foi diferente entre os marcadores,uma vez que cada um deles agem em momentos distintos da adesão celular.A FAK apresenta uma redução em 4 horas, no entanto após 24 horas há um aumento da sua expressão. Já a paxilina e faloidina são inibidas nessas células após 4 e 24 horas de exposição a Lb,o que reforça a presença do parasito pode regular a migração através dos marcadores de adesão.Além disso, o ensaio de transwell mostrou que a Lb reduz a migração das células no incerto.Esses dados mostram que a Lb é capaz de reduzir a migração celular através da modulação dos complexos de adesão celular e acredita-se que após a transfecção com o miR-205 esse fenômeno será revertido.Os mecanismos moleculares do miR-205 associados ao processo de migração de queratinócitos expostos a Lb e sua relação com o fechamento de feridas são fundamentais para propor novas estratégias terapêuticas para serem utilizadas na prática clínica.

Palavras-chave

Leishmaniose Cutânea; Leishmania braziliensis; miR-205 Queratinócitos,Migração.

Agradecimentos

CNPq,CAPES,Fapesb