Dados do Trabalho

Título

IDENTIFICAÇÃO DE COMPLEXOS DE RUTÊNIO CONTENDO TIOBENZAMIDA COM POTENTE ATIVIDADE ANTI-Trypanosoma cruzi INDUTORES DE MORTE CELULAR POR APOPTOSE

Introdução

O tratamento da doença de Chagas baseia-se na utilização do benzonidazol e do nifurtimox, fármacos que apresentam eficácia limitada, além de estarem associados a diversos efeitos adversos. Nesse cenário, a busca por novas drogas para tratamento da doença de Chagas é de grande interesse.

Objetivo (s)

Avaliar o potencial anti-Trypanosoma cruzi de inéditos complexos de Ru(II) contendo tiobenzamida.

Material e Métodos

A citotoxicidade dos compostos cis-[RuCl(tbz)(phen)2]+PF6- (FOR0212A), cis-[RuCl(tbz)(bpy)2]+PF6- (FOR0012A), -[RuCl2(bpy)2] (FOR000); cis-[RuCl2(phen)2] (FOR020) e Tiobenzamida (FORLTB) foi avaliada em linhagens de células de mamíferos (H9c2 e L929), pelo método de AlamarBlue. A atividade tripanocida das moléculas foi avaliada sobre formas tripomastigotas e amastigotas de T. cruzi (cepa Y). O padrão da morte celular foi determinado por citometria de fluxo após dupla marcação com anexina V e iodeto de propídio (PI) e com MitoSox em tripomastigotas. O mecanismo de ação parasiticida também foi analisado por microscopia eletrônica de varredura.

Resultados e Conclusão

Diferentemente da tiobenzamida e dos compostos FOR000 e FOR020, os complexos FOR0012A e FOR0212A apresentaram uma potente e seletiva atividade tripanocida frente as formas tripomastigotas com valores de CI50 de 0,13 e 0,09 μM, respectivamente, sendo mais ativos que o benzonidazol (CI50 = 12,5 μM). Em comparação com a doxorrubicina, os compostos apresentaram baixa citotoxicidade e os complexos FOR0012A e FOR0212A se destacaram apresentando índices de seletividade superiores a 50. Tais complexos também foram testados em modelo de infecção in vitro, apresentando valores de CI50 de 1,8 e 0,32 μM, respectivamente, frente as formas amastigotas, sendo mais ativos que o benzonidazol (CI50 = 2,5 μM). A morte parasitaria induzida pelos complexos foi associada à deformação e encolhimento celular, assim como o aparecimento de blebs na membrana plasmática. Ensaios de citometria de fluxo indicam que a morte celular induzida pelos complexos é por apoptose e está relacionada com dano oxidativo na mitocôndria. Com isso, concluímos que Apenas os complexos FOR0012A e FOR0212A apresentam uma atividade tripanocida promissora, com valores de CI50 significativamente
menores aos do benzonidazol, sendo a morte parasitária via apoptose.

Palavras-chave

Doença de Chagas; Trypanosoma cruzi; Complexos de rutênio; Tioamidas

Agradecimentos

FIOCRUZ-BA, UNEB, SENAI/CIMATEC, IFBA, CNPq, CAPES, PRONEX e FAPESB.