Dados do Trabalho

Título

Avaliação in vitro da capacidade infectiva do vírus ZIKV frente à hepatócitos e células estreladas hepáticas

Introdução

Vírus Zika (ZIKV) foi associado a complicações neurológicas em indivíduos adultos e microcefalia em neonatos. Estudos demonstraram a detecção do RNA viral e inflamação severa no fígado de camundongos imunodeprimidos. Sendo assim, há a possibilidade de infecção por esse flavivírus em pacientes com doença hepática pré-estabelecida. As doenças hepáticas crônicas, levam a inflamação crônica hepatocelular que pode evoluir para a fibrose, e as células estreladas hepáticas (CEHs) são as principais envolvidas na síntese de componentes da matriz extracelular.

Objetivo (s)

Assim, avaliamos a capacidade infectiva do ZIKV à hepatócitos e CEHs e suas implicações no reparo hepático.

Material e Métodos

Para tal, utilizamos as linhagens celulares HepG2, LX-2 e GRX após a infecção pelo ZIKV na multiplicidade de infecção (MOI) de 0,1 e a linhagem Vero como controle da infecção viral. Foi realizada curva de crescimento viral one step, para os intervalos de 12, 24, 48, 72, 96 e 120h após infecção. A produção viral foi determinada por titulação pelo método de TCID50 em células Vero. Além disso, uma curva de viabilidade celular para 24, 72 e 120h após infecção, pela técnica de XTT. A infecção foi confirmada pelo Kit molecular ZDC. A citocina pró-fibrogênica TGF-β1 foi quantificada a partir de sobrenadante pelo ELISA.

Resultados e Conclusão

A linhagem HepG2 apresentou os títulos virais mais altos entre as células de interesse, sendo detectável 48h após infecção, atingindo o pico com 96h (5,874×106 TCID50/mL). Para as CEHs, a linhagem LX-2 apresentou título viral detectável 24h após infecção, sendo semelhante durante toda a avaliação (3,491×104 TCID50/mL em média). As células GRX produziram menos partículas virais com média de 1,2×102 TCID50/mL. As células HepG2 e LX-2 apresentaram efeitos citopáticos 120h após infecção como vacuolização e destacamento da superfície e perda de viabilidade severa com média de 40% após esse mesmo período. Já nas GRX não houve diferença entre infectada e controle. Para a citocina pró-fibrogênica TGF-β1 observou-se aumento da produção em todas as linhagens: nas CEHs, a partir de 48h e nos hepatócitos, a partir de 72h. Sendo assim, ZIKV é capaz de infectar as linhagens avaliadas e levar à perda da viabilidade nas células HepG2 e LX-2. Ainda, a infecção pelo ZIKV influencia o processo de fibrogênese, sugerindo que esse vírus pode descompensar doenças hepáticas pré-estabelecidas em pacientes.

Palavras-chave

ZIKV; Células estreladas hepáticas; Reparo hepático.

Agradecimentos

Instituto Aggeu Magalhães/FIOCRUZ, Facepe e CAPES.