Dados do Trabalho

Título

Vacina poliepítopo contra a leishmaniose visceral desencadeia uma resposta celular do tipo Th1 e memória imunológica em camundongos BALB/c desafiados experimentalmente por Leishmania infantum

Objetivo (s)

Neste estudo, avaliamos um candidato vacinal, quanto a sua capacidade em desencadear resposta imune humoral, celular e memória imunológica após imunização e desafio experimental por Leishmania infantum.

Material e Métodos

Para tanto, camundongos BALB/c foram divididos nos grupos controle Salina, adjuvante Poly-ICLC, proteína quimérica A sozinha e combinada com o adjuvante vacinal (Qui-A/Poly-ICLC). O protocolo de imunização consistiu em 3 imunizações subcutâneas (SC) ou intradérmicas (ID), com intervalo de 15 dias entre as doses. Quinze dias após a terceira e última imunização, os animais foram desafiados com 1×10^6 promastigotas de L. infantum via intravenosa e eutanasiados após 45 dias. Os parâmetros avaliados foram a produção de citocinas intracitoplasmáticas (IL-2, TNF e IFN e IL-10), proliferação de linfócitos T e suas subpopulações, e memória imunológica em esplenócitos por citometria de fluxo multiparamétrica. Ainda, avaliamos o perfil de imunoglobulinas séricas IgG total e os subtipos IgG1 e IgG2a anti-antígeno vacinal através do ensaio imunoenzimático ELISA.

Resultados e Conclusão

Observamos aumento de IgG total, IgG1 e IgG2a anti-antígeno vacinal após protocolo de imunização completo com Qui-A/Poly-ICLC, independente da via de imunização empregada. Os animais imunizados com Qui-A/Poly-ICLC apresentaram aumento do percentual de linfócitos T CD4+ e T CD8+ ativados produtores das citocinas IL-2, TNF e IFN, enquanto a produção de IL-10 foi reduzida por essas células. Ainda, a imunização via SC com Qui-A/Poly-ICLC elevou a produção dessas citocinas quando comparada à imunização ID, exceto para IL-2 produzida por linfócitos T CD8+. Adicionalmente, a imunização com Qui-A/Poly-ICLC elevou o percentual de linfócitos T totais, T CD4+ e T CD8+ proliferados após estimulação antigênica, bem como de células T CD4+ e T CD8+ de memória efetora e central após imunização com a Qui-A/Poly-ICLC, independente da via de imunização, em comparação aos grupos controle Salina e adjuvante, exceto para TCD8+ expressando o fenótipo de memória central após imunização SC. Nossos resultados revelaram que a imunização SC com a Qui-A/Poly-ICLC promoveu maior proliferação celular, além do aumento do percentual de células T CD4+ expressando o fenótipo de memória efetora em comparação à imunização ID. Ainda, evidenciam o potencial imunogênico do candidato vacinal.

Palavras-chave

Leishmaniose visceral; Leishmania infantum; vacina; memória imunológica; resposta humoral.

Agradecimentos

Agradecemos à UFOP, PROPPI, LIMP, CCA, CAPES, CNPq, FAPEMIG e INCT-DT.